Gibelaren funtzioa zaintzeko sistema berritzaile eta merkea, paperean oinarritua

LABURPENA

Gibeleko lesioen ebaluazio kuantitatiborako bide garrantzitsuenetako bat den heinean, analizatzaile biokimikoa ohiko proba-metodo bat da. Hala ere, ez da oso erabilia errenta ertain-baxuko herrialdeetan (ERBH), langile mugatuak, finantzaketa falta eta ingurumen-arazo konplexuak direla eta. Gibeleko lesioen informazioa azkar nola lortu erabaki klinikoak hartzeko laguntza indartsua eskaintzen duen metodo sinple eta eraginkor batekin, oraindik erronka bat da ERBHentzat. Arazo horri aurre egiteko, gibeleko lesioetarako arreta-puntuko sistema berritzaile eta erabilerraza diseinatu dugu. Sistema honek bi fotoiko makro fotokimiko sentsore batean oinarritutako detekzio-gailu bat eta odol-zelulak iragazteko sistema integratua duen paperezko proba-txartel bat ditu. Bi fotoiko egitura sistemaren bolumen eta kostu orokorra murrizteko erabiltzen da, tresnaren muntaketa-prozesuan sartutako estazio arteko erroreak konpontzen ditu. Odol-zelulak iragazteko sistemak funtzionamendu-konplexutasuna murrizten du, eta odola zuzenean iragazi, erreakzionatu eta kolorea alda dezake proba-txartelean. Detekzio-gailuak paperezko proba-txartelaren etengabeko islapen-seinalea lortzen du eta seinalea kuantifikatzen du gibeleko kalteen indizeen proba kuantitatiboa osatzeko. Sistemaren errendimendua ebaluatzeko, herrialde txiki eta ertainen ingurune nazionala simulatu genuen: 35 ℃ eta % 90eko hezetasun erlatiboan, 40 heparina odol osoan, R korrelazioa² Gure sistemaren eta MindrayBS350sen arteko aldea 0,95etik gorakoa zen. Randox Kalitate Kontrolaren 2. eta 3. mailako errepikakortasun-CV-a % 7,5etik beherakoa izan zen. Emaitzek erakusten dute sistema ez dela tamaina txikikoa, kostu txikikoa eta funtzionamendu erraza bakarrik, baizik eta bere neurketa-errendimenduak eta egonkortasunak tenperatura altuko eta hezetasun handiko inguruneen eskakizun klinikoak betetzen dituztela, eta, beraz, herrialde txiki eta ertainetan erabil daitekeela gibeleko funtzioaren baheketa primariorako eta gibeleko gaixotasunen progresioa ebaluatzeko.

Gako-hitzak: Islapen-espektroa; sentsore fotokimikoa; seinale anitzeko prozesamendua; gibeleko lesioen detekzio azkarra; POCT analizatzailea; LMICak

1. SARRERA

Gibeleko gaixotasunak zama izugarria bihurtu dira munduko osasun publikoarentzat, urtero 2 milioi pertsona baino gehiago hiltzen baitituzte mundu osoan.^1,2Heriotza horien zati handi bat tratatu daiteke (B hepatitis kronikoa, adibidez), sendatu (C hepatitis kronikoa, adibidez) edo prebenitu (botikek eragindako gibeleko gutxiegitasuna, adibidez) diagnostiko eta tratamendu garaiz eginez.³Gibeleko gaixotasunen diagnostikoa metodo ez-inbaditzaileen bidez egiten da gaur egun, besteak beste, ultrasoinuak eta berehalako irudi elastikoak, baita odoleko markatzaile biokimikoen neurketa ere. Hala ere, diagnostiko teknika hauek ekipamendu sofistikatuak behar dituzte, langile ondo prestatuak dituztenak, eta askotan ez daude eskuragarri errenta ertain-baxuko herrialdeetan (LMIC), baliabide mugatuak baitituzte gibeleko lesioen detekzioa, diagnostikoa eta jarraipena oso zailduz.^4-7Ondorioz, jende asko gaixotasunen fase aurreratuetaraino diagnostikatu gabe gera daiteke, eta horrek erabaki klinikoak hartzeko atzerapen handiak eta ondorengo tratamendurako kostu handiak dakartza. Aditu askok aitortu dute gibeleko gaixotasunak detektatzeko arazoa herrialde txiki eta ertainetan.³, eta herrialde horientzat gibeleko funtzio-lesioak azkar neurtzeko metodo azkar, eraginkor eta eramangarri bat garatzeko premiazko beharra adierazi zuen.

*liyingchun@konsung.com;

Alanina aminotransferasa (ALT), aspartato aminotransferasa (AST) eta albumina (ALB) hiru biomarkatzaileak gibeleko lesioen detekzio klinikoan erabili ohi dira, eta horietako baten edo guztien igoera da gibeleko funtzioaren azterketan ohikoena den fenomeno anormala. ALT, AST eta ALB detekzioa erabil daitezke gibeleko lesioen aurretiazko epaiketarako eta gibeleko gaixotasunen progresioa ebaluatzeko.^8-13Gaur egun, bi motatako FDAk onartutako gibelaren funtziorako kimika klinikoko gailu daude, normalean herrialde txiki eta ertainetan erabiltzen direnak: LDXH (Alere, San Diego, CA) eta Roche ReflotronH Plus (Roche Diagnostics, Indianapolis, IN). Bi gailu mota hauek ALT eta AST neurketak egin ditzakete hatz-puntako odolean, seruma bereizi beharrik gabe. Hala ere, baliabide mugatuak dituzten herrialde txiki eta ertainentzat, garestiak dira (ekipoak 3000-6000 dolar estatubatuar, proba-piezak >4 dolar estatubatuar).¹⁴ eta aplikatzeko konplexuak, teknikari ondo prestatuak, energia-hornidura egonkorra eta aldi berean markatzaile bakarra probatzea behar dituztenak.

ALT, AST eta ALB puntuz puntu neurtzeko detekzio azkarreko plataforma eta proba-txartel bat garatu dugu islapen-fotometrian oinarrituta, herrialde gutxi eta ertainen ingurunerako egokia dena, kostu baxua, erabiltzeko erraztasun handia, odol osoko/hatz-puntako odol-analisiak egiteko gaitasuna eta laborategiko energia-hornidurarekiko independentzia dituena. POCT analizatzaile bat eta dagokion paperezko proba-txartela dituen Point of Care Testing (POCT) proba-sistema eramangarria da. Sistema hau erabiliz, neurtu beharreko odola eskualde espezifiko batera drainatu daiteke, eta pixkanaka odol-zelulen iragazketa osatuko da, ondoren entzimei lotutako erreakzioa eta koloreen errendatzea egongo dira. Azkenik, POCT gailuak lortutako paperezko proba-txartelaren islapen-kurba espektralaren kuantifikazioa egiten da eta ondoren ALT, AST eta ALBren kontzentrazioa kuantifikatzen da. Kostu baxuaren, gailuaren eramangarritasun errazaren, probak egiteko gune mugagabearen eta abiadura handiaren abantaila handiek gibeleko gaixotasunen baheketa kliniko, ebaluazio eta tratamendu zerbitzuak zabaltzen eta deszentralizatzen lagunduko dute diru-sarrera gutxiko herrialdeetan, eta sistema honek laguntza indartsua emango du baliabide ekonomiko mugatuak dituzten diru-sarrera gutxiko herrialdeetan proba zabaletarako.

2. METODOAK

2.1 Printzipioak
Sistema hau Kubelka-Munk teorian (KM teoria) oinarritzen da. KM teoria, oro har, xurgapen ahuleko laginetatik lortutako islapen lausoaren espektroen analisietarako erabiltzen da, islapenaren eta kontzentrazioaren arteko korrelazioa emanez. Xurgatzaile espezie baten kontzentrazioa Kubelka Munk formula erabiliz zehaztu daiteke:
 

Non R = islapen-koefizientea, k = xurgapen-koefizientea, s = sakabanatze-koefizientea, c = xurgatzaile-espeziearen kontzentrazioa eta A = xurgapen-koefizientea diren.¹⁵.

Odolak sistemaren paper-oinarritutako proba-txartelaren proba-eremuan erreakzionatuko du, kolore-aldaketa eraginez, eta aldaketa-maila kontzentrazio erlazionatuekin proportzionala da. KM teoriaren arabera, material eta lodiera bereko proba-piezen sistema sorta batentzat, argi-iturri berak irradiatuta, k substantziaren c kontzentrazioaren proportzionala izango da, F(R) c-rekin proportzionala, eta orduan xurgapen-espezieen kontzentrazioa islagarritasunaren balioaren bidez kuantifikatu daiteke.


2.2 Paperezko gibeleko funtzio-probak
Paperezko proba-txartelak hainbat paper-geruza estanpatuz eginda daude (1. irudia), eta geruza bakoitzak funtzio eta material desberdinak ditu. Paperaren geruza anitzeko geruzak bertikalki konbinatzen/muntatzen dira material polimerikoekin, erreaktiboen proba-txartel bat osatzeko. Goiko geruzak gasa hidrofiliko isotropiko bat erabiltzen du, odola plasma bereizteko eta probatzeko detekzio-eskualde izendatura bideratzen duen bide mikrofluidiko hidrofiliko bat osatzeko. Proba-txartelean lau eskualde independente daude, eta horietatik hiru proba-eremuak dira, ALT, AST eta ALB neur ditzaketenak, hurrenez hurren; gainerakoa salbuespenen identifikazio-eskualde bat da, gailuaren errendimendu normala bermatzeko. Lau eremu bakoitzak ingurune berezia du (erreaktiboak, bufferrak, adierazleak, adibidez), neurketa-prozesua azkarra eta elkarrengandik independentea izan dadin. Sistema hau erabiliz, lagina gehitzen denetik erreakzioa amaitu arteko denbora osoa 3 minutu baino gutxiago da. ALT eta AST neurtzea peroxidasa metodoan oinarritzen da.¹⁶, eta ALB bromokresol berdearen metodoan oinarrituta¹⁷Analizatzaileak neurtu beharreko substantziaren kontzentrazioa kuantifikatzen du proba-txartelaren kolore-aldaketa atzemateko.^18,19.

1. irudia. Paperezko proba-txartelaren egitura (ezkerrekoa), eta ALB, AST eta ALT proba-txartelen kolore-aldaketa, hurrenez hurren, lagina gehitu eta 3 minutura.

2.3 Gibelaren funtzio-proben plataforma merkea arreta-puntukoa
POCT gailua paperezko proba-txartelen kolore-aldaketak harrapatzeko eta kontzentrazio-irteera bihurtzeko erabiltzen da. Gailuak laginketa-modulua, detekzio fotoelektrikoko modulua, seinaleen analisi-modulua, potentzia-modulua eta pantaila-modulua ditu, eta modulu bakoitza modu independentean diseinatuta dago mantentze-lan errazak egiteko. Lagin-modulua proba-txartela finkatzeko erabiltzen da, eta modulu fotoelektrikoa informazio desberdina lortzeko eta informazio optikoa seinale elektriko bihurtzeko. Paperezko proba-txartela lagin-moduluan sartu ondoren, odol-tantak gehituko dira. Odola paperezko proba-txartelean sartzen da, odol-mamiaren bereizketa eta erreakzio kimiko batetik igarotzen da, eta ondoren sortutako kolore-aldaketak POCT gailuaren detekzio fotoelektrikoko moduluak jasotzen ditu. Seinaleen analisi-moduluaren seinale-kontzentrazio bihurketa-ereduaren bidez, ALT, AST eta ALB kontzentrazioak eskuratzen dira eta azkenik pantaila-moduluak bistaratzen ditu.

POCT gailu baten muina den fotodetekzio-modulurako, txanpon baten tamainako 4 kanaleko mikro-bi fotoi-argi-iturri bikoitzeko sentsore fotokimiko difuso bat diseinatu dugu bereziki. Kanal bakoitzak uhin-luzera desberdineko 2 argi-iturriz, uhin-luzera bereko 2 argi-iturriz eta argia jasotzeko sentsore 1 ditu, 2. irudian erakusten den bezala. Ohiko ekipamendu biokimikoek ez bezala, hemengo mikro-sentsore fotokimikoaren diseinua energia-kontsumo txikikoa da eta litiozko bateriaren bidezko elikadurarekin, ohiko elikadura-iturriarekiko menpekotasunetik libre egongo da. Horrela, gailuaren eramangarritasuna eta aplikagarritasuna hobetzen dira. Argi-iturri bikoitzak igorritako argia lenteak prozesatu ondoren, neurtu beharreko subjektuaren gainazala argitzen du. Subjektuaren islatutako argia sentsoreak jasotzen du lenteak prozesatu ondoren, gero seinale elektriko bihurtzen da eta uhin-luzeraren funtzio gisa erregistratzen da. Une honetan, sentsoreak jasotzen duena ezkerreko eta eskuineko muturretan dauden argi-iturrietatik datozen seinaleen gainjartzea da, eta islatutako seinalea indartu egiten da. Bi argi-iturrien arteko distantzia aurrez diseinatuta dagoelako, haien islatutako seinaleak osagarriak izan daitezen. Diseinu honen bidez, tresnaren muntaketa-prozesuan distantzia-erroreak eragindako estazio desberdinen arteko seinale-aldea minimora murriztu daiteke, beraz, ez dago ekipamendu desberdinen artean kalibratzeko beharrik, ekoizpen-kostua murriztuz, eta, aldi berean, ekipamenduaren mantentze-lanak fabrikatik irten ondoren errazagoak eta erosoagoak izango dira.

2. irudia. Detekzio fotoelektrikoaren modulua eta kanal bakarreko bi fotoiko makro fotokimiko sentsorearen eskema.

2.4 Ikerketaren diseinua
Ekipamendu honen bideragarritasuna egiaztatzeko, herrialde txiki eta ertainetan (LBI) odol osoaren neurketaren zehaztasuna eta Randox Kalitate Kontrolaren errepikagarritasuna probatu genituen % 90eko hezetasun erlatiboan 35 °C-tan. Odol osoko laginak, heparina sodiozko odol osoa, 2023ko maiatzean bildu ziren Zhenjiang-eko hirugarren herri ospitalean. Laginak bi kopiatan banatu ziren, bat zentrifugatu eta gero MindrayBS350s makinan (Mindray, Shenzhen, Txina) probatu zen tenperatura normalean, bestea artikulu honetan proposatutako POCT sistemarekin probatu zen % 90eko hezetasun erlatiboan 35 °C-tan eta emaitzak erregistratu ziren. Hemen, Randox Kalitate Kontrola (Randox, Ipar Irlanda, Erresuma Batua) 2. mailakoa (1503UN lotea) eta 3. mailakoa (1223UN lotea) 35 °C-tan eta % 90eko hezetasun erlatiboan probatu ziren, hurrenez hurren, POCT analizatzailearekin eta proba-txartelekin 10 aldiz.

2.5 Analisi estatistikoa
Datuen analisia eta erregresio-diagramen sorrera Excel2013 erabiliz egin ziren. Erregresio-diagramak marraztu ziren eta korrelazio-koefizientea R² Ikerketa honetako sistemaren eta MindrayBS350en artean emaitzetan ikusitako desberdintasunetarako kalkulatu ziren, eta aldakuntza-koefizientea (CV) kalkulatu zen neurketaren errendimendua ebaluatzeko.

3. EMAITZAK

3.1 Funtzionamendu-baldintzak eta saiakuntzaren errendimendua
Heparina odoleko 40 kasuetan, korrelazioa, R²ALT, AST eta ALBren balioak MindrayBS350ekin 0,9909, 0,9918 eta 0,9913 izan ziren, hurrenez hurren, 35 °C-tan eta % 90eko hezetasun erlatiboan, 3. irudian erakusten den bezala. Hiru elementuen R2 guztiak 0,95 baino handiagoak izan ziren, eta horrek adierazten zuen gailuaren eta bere erreaktibo lagungarrien emaitzek korrelazio ona zutela MindrayBS350s gailu biokimiko klinikoaren emaitzekin ingurune horretan.

3. irudia. MindrayBS350s-ekin duen korrelazioa ALT, AST eta ALB osoetarako 35 °C-tan eta % 90eko hezetasun erlatiboan.

3.2 Zehaztasuna
Multzo barruko zehaztasunak multzo barruko neurketa-errorea adierazten du, errepikagarritasun gisa ere ezagutzen dena, eta operadore berak lagin berean behin eta berriz zehazten du. 35 °C-tan eta % 90eko hezetasun erlatiboan, ekipamenduaren eta proba-txartelen zehaztasuna Randox kalitate-kontrola erabiliz ebaluatzen da inguruneak ausazko errore hutsalak sartzen dituela egiaztatzeko. Emaitzak 1. taulan ageri dira, Randox kalitate-kontrolaren ALT 2. mailako CV % 5,8 da, 3. maila % 4,5; AST 2. mailako CV % 6,5 eta 3. mailako CV % 2,5. ALB 2. maila % 5,7 da, 3. maila % 7,3. ALT eta AST Txinako analizatzaile kimiko lehorren industriaren estandarrekin bat datoz.²⁰ALT eta AST-ren aldakortasun-koefizientea % 12 edo txikiagoa da 40U/L ~ 60U/L kontzentrazio-tartean, eta % 5 edo txikiagoa da 100U/L ~ 300U/L kontzentrazio-tartean CV; Goian aipatutako analito guztiek betetzen dute merkatuan dauden POCT analizatzaile biokimiko lehor gehienen eskuliburuan zerrendatutako % 7,5etik beherako CV baldintza. Emaitzek erakusten dute 35 °C-ko eta % 90eko hezetasun erlatiboaren baldintzetan, ekipamenduaren eta proba-txartelaren CV-a onargarri den tartearen barruan dagoela, eta ingurune horretan proba-txartelaren ausazko errorea onargarria dela.
 
1. taula: ALT, AST eta ALB Randox kalitate kontrol esperimentua eta emaitzak.

4. EZTABAIDA ETA ONDORIOAK

Hamarkadetan zehar, analizatzaile biokimikoak erabili izan dira gibeleko markatzaile hematologikoak, hala nola ALT, AST eta ALB, detektatzeko metodo hobetsi gisa. Gizakien zain-odol periferikoa bildu ondoren, laborategi zentral batera eramaten da, non teknikari trebatuek seruma bereizten duten eta analizatzaile biokimiko batekin aztertzen duten. Itxuraz ohikoak diren detekzio-metodo hauek oso zailak dira herrialde txiki eta ertainentzat, honako arrazoiengatik: ekipamendu garestia, proba-ingurune egonkorra behar da eta probak egiteko teknikari ondo prestatuak daude eta beharrezko mantentze-lanak egiten dituzte. Gainera, detekzioa egin daitekeen arren, herrialde txiki eta ertainen ingurune sakabanatuak detekzio-emaitzak atzeratuko ditu.

Artikulu honetan, gibeleko lesioen indizeak detektatzeko kostu txikiko eta abiadura handiko sistema bat diseinatu da. Dauden POC gailuekin eta aurretik argitaratutako ikerketekin alderatuta. ^{21, 22, 23}Gure POCT gailuek ALT, AST eta ALBren probak kuantitatiboak aldi berean egin ditzakete. Energia-kontsumo txikiko eta litiozko bateriaren diseinuari esker, proba horiek edonoiz eta edonon egin daitezke, proba-gunearen energia-horniduratik independenteki. Odol periferikoa zuzenean probatu daitekeenez, ez dago zentrifugazio-prozesu konplikaturik behar proba egin aurretik. Eta higienista nagusiek, prestakuntza sinple baten ondoren, proba ondo egin dezakete. Kostua 700 $/tresna baino txikiagoa da, eta paperezko proba-txartela 3 $/pieza baino txikiagoa. Gainera, esperimentu-lana laborategian HBI herrialdeetako tenperatura eta hezetasun handiko ingurunean egin dugu, HBI herrialdeetan duen eraginkortasuna egiaztatzeko. 35 ℃-tan eta % 90eko hezetasunean, ALT, AST eta ALBren eta MindrayBS350s ekipamendu biokimiko kliniko handiaren arteko korrelazioa >0,95 izan zen, hurrenez hurren, eta Randox-en kalitate-kontrolaren errepikagarritasuna

Laburbilduz, artikulu honetan proposatutako POCT analizatzaileak eta haren laguntza-erreaktiboek edo proba-txartelak abantaila hauek dituzte:
1. Lehen mailako osasun-arretako langileek prestakuntza sinple batekin erabil dezakete; 2. Paperean oinarritutako sistema erraz erabiltzen eta mantentzen da; 3. Hiru analisi kuantitatiboak, ALT, AST eta ALB, aldi berean probatu daitezke, proba-denbora 3 minutukoa da eta odol-bolumena

ESKERRONAK

Artikulu honetako funtzionamendu-baldintzen eta analisi-errendimenduaren azterketa Diagnostiko Berri Berrietarako Fundazioak (FIND) finantzatu du.

ERREFERENTZIAK

[1] Byass, P., "Gibeleko gaixotasunen zama globala: erronka bat metodoentzat eta osasun publikoarentzat", BMC Med. 12 (2014).
[2] Marcellin P., Kutala BK, "Gibeleko gaixotasunak: osasun publikoko arazo nagusi eta ahaztua, premiazko neurriak eta eskala handiko baheketa behar dituena", Liver Int 38 Suppl. 1: 2-6 (2018).
[3] Moed S, Zaman MH, "Gibeleko lesioak diagnostikatzeko tresna hobeak lortzeko errenta baxuko eta ertaineko herrialdeetan", BMJ Global Health. 4: e001704(2019).
[4] Yadav, H., Shah, D., Sayed, S., et al., "Diagnostiko funtsezkoen eskuragarritasuna hamar errenta baxuko eta ertaineko herrialdetan: osasun-zentroen inkesta nazionalen emaitzak", The Lancet Global Health. 9(11): e1553- e1560(2021).
[5] Fleming, KA Horton, S., Wilson, ML, Atun, R., etab., "Diagnostikoei buruzko Lancet Batzordea: diagnostikoetarako sarbidea eraldatzen", The Lancet. 398:1997-2050 (2021).
[6] Reipold, EI, Trianni, A., Krakower, D., et al., "Balioak, lehentasunak eta B eta C hepatitisaren probak egiteko egungo praktikak errenta baxuko eta ertaineko herrialdeetan: azken erabiltzaileei eta inplementatzaileei egindako inkesta baten emaitzak", BMC Infectious Diseases. 17(1):149-157 (2017).
[7] Cainelli, F., "Gibeleko gaixotasunak garapen bidean dauden herrialdeetan", World J Hepatol. 4(3): 66-67(2012).
[8] Dufour DR, Lott JA, Nolte FS, etab., "Gibeleko lesioen diagnostikoa eta monitorizazioa. II. Laborategiko probak erabiltzeko gomendioak baheketan, diagnostikoan eta monitorizazioan", Clin Chem. 46(12): 2050–2068(2000).
[9] Whitehead MW, Hawkes ND, Hainsworth, I., et al., "Gibeleko jatorriko aspartato aminotransferasa nabarmen igotzearen kausen ikerketa prospektiboa", Gut. 45(1):129–133(1999).
[10] Daniel, S., Ben-Menachem, T., Vasudevan G., et al., "Gibeleko transaminasen anomalia kroniko azaldu gabeen ebaluazio prospektiboa paziente asintomatiko eta sintomatikoetan", Am J Gastroenterol. 94(10):3010–3014(1999).
[11] McLernon, DJ, Donnan, PT, Sullivan, FM, et al., "Lehen mailako arretan gibeleko funtzio-probak egiaztatu zaizkien pazienteen gibeleko gaixotasunen iragarpena: populazioan oinarritutako behaketa-kohorteak erabiliz ereduaren garapena eta baliozkotzea". BMJ Open. 4(6): e004837(2014).
[12] Doumas, BT, Peters Jr, T., "Serumeko eta gernuko albumina: haien neurketaren eta garrantzi klinikoaren aurrerapen txostena", Clinica Acta. 258(1):3-20(1997).
[13] Newsome, PN, Cramb, R., Davison, SM, "Gibeleko odol-analisi anormalen kudeaketari buruzko jarraibideak", Gut. 67: 6-19 (2018).
[14] Pollock, NR, Rolland, J. P, Kumar, S., et al., "Paperean oinarritutako transaminasa multiplexatutako proba bat kostu baxuko eta arreta-puntuko gibeleko funtzio-probak egiteko", Sci Transl Med. 4: 152ra129 (2012).
[15] Kubelka, P., Munk, F., "Pintura-estalduren optikari egindako ekarpena", Physik. 12: 593-601 (1931).
[16] Long, LH, Halliwell, B., "Zelula-kulturako artefaktuak: α-Ketoglutaratoak askorbatoak eta epigalokatekina galatoak zelula-kulturako medioetan sortutako hidrogeno peroxidoa har dezake". Biochemical and Biophysical Research Communications. 406:20-24 (2011).
[17] Wells, F. E, Addison, G. M, Postlethwaite, RJ, "Hemodialisi-pazienteen serumeko albumina-analisia: bromokresol morearen, bromokresol berdearen eta elektroimmunosaioaren arteko desadostasunak," Ann Clin Biochem. 22: 304-309 (1985).
[18] Giusti, G., Ruggiero, G., Cacciatore, L., "Gibeleko gaixotasunetan serumeko glutamiko-oxaloazetiko eta glutamiko-pirubiko transaminasa zehazteko zenbait prozedura espektrofotometriko eta kolorimetrikoren azterketa konparatiboa", Enzymol Biol Clin. 10(1):17-38(1969).
[19] Rodgerson, DO, Osberg, IM, "Aspartato aminotransferasa eta alanina aminotransferasa jardueren neurketa espektrofotometrikoan errore iturriak serumean," Clin Chem. 20: 43-50 (1974).
[20] CFDA, "YYT 0655-2008 Kimika lehorreko analizatzailea", 1-8(2008).
[21] Chang, KS, Chang, CK, Chou, SF, et al., "Aminotransferasa jardueren neurketa sekuentziala biosentsore anperometrikoen bidez," Biosensors and Bioelectronics. 22(12): 2914-2920(2007).
[22] Thuy, T., Tseng, T., Thuy, TNT, etab., "Alanina aminotransferasa azkar eta selektiboki detektatzeko mikro-platinozko harizko biosentsore bat", Sensors. 16(6):767-781(2016).
[23] Jain, S., Rajasingham, R., Noubary, F., et al., "Hatz-puntzioko eta bena-punturako laginetan alanina aminotransferasa (ALT) azkar neurtzeko paper-oinarritutako proba optimizatu baten errendimendua", PLoS One. 10:1-15 (2015).